免疫沉淀（IP）

1. 技术定义

  免疫沉淀（Immunoprecipitation，简称 IP）是利用抗原与抗体的特异性结合，从复杂样本中富集目标蛋白的技术。

2. 原理

  样本中目标蛋白与特异性一抗结合→加入偶联蛋白A/G的琼脂糖/磁珠（可结合抗体 Fc 段）→通过离心/磁分离收集 “磁珠-抗体-目标蛋白” 复合物→洗脱复合物并去除抗体→通过WB等方法检测目标蛋白，实现目标蛋白的富集与定性分析。根据样本类型可分为常规IP（全蛋白提取样本）、核蛋白IP（核蛋白提取样本）、膜蛋白IP（膜蛋白提取样本），适用于蛋白表达验证、蛋白修饰检测等。

3. 技术流程

4. 核心应用

目标蛋白富集：从复杂样本中富集低丰度目标蛋白，提高后续检测灵敏度。

蛋白修饰检测：富集目标蛋白后，检测其翻译后修饰。

蛋白纯度验证：验证重组蛋白的纯度。

临床样本分析：少量临床样本中目标蛋白的富集与检测，辅助疾病机制研究。

5. 样本要求